Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
LOXL4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-426632
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- LOXL4 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico LOXL4, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: LOXL4 Anticuerpo (B-6): sc-365822
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
LOXL4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-426632 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Loxl4 codifica la lisil oxidasa tipo 4 (LOXL4), una aminooxidasa dependiente de cobre que cataliza la desaminación oxidativa de residuos de lisina en el colágeno y la elastina, promoviendo el entrecruzamiento covalente y la estabilización de la matriz extracelular (MEC). A través de la remodelación de la MEC, LOXL4 influye en programas de adhesión celular, migración y mecanotransducción vinculados al desarrollo y la reparación de los tejidos. La alteración de la actividad de la familia LOXL se ha asociado con remodelación fibrótica y cambios en la arquitectura del microambiente tumoral, lo que hace que Loxl4 sea relevante para estudiar la regulación de la inflamación impulsada por la MEC, la biología vascular y la dinámica epitelio-mesenquimal. En sistemas murinos, la perturbación de Loxl4 facilita estudios mecanísticos sobre la homeostasis del tejido conectivo y las vías de señalización dependientes de la matriz.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO LOXL4 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Loxl4 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Loxl4 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Loxl4 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína LOXL4.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Loxl4 para la investigación de la señalización de LOXL4, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Loxl4 críticos para la función de LOXL4
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Loxl4 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido LOXL4 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido LOXL4 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Loxl4. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR LOXL4 (m) y el plásmido HDR LOXL4 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Loxl4 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Loxl4 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.