Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (m) Lipin-1: sc-420378-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)Lipin-1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Lipin-1 (m) y el plásmido de doble nickasa Lipin-1 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Lpin1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Lipin-1 Anticuerpo (B-12): sc-376874
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) Lipin-1 | sc-420378-NIC | 20 µg | $410.00 |
El gen murino Lpin1 codifica Lipin-1, una fosfatasa de ácido fosfatídico (PAP1) dependiente de Mg²⁺ que convierte el ácido fosfatídico en diacilglicerol, conectando la biosíntesis de glicerolípidos con la remodelación de lípidos de membrana y la señalización lipídica. Más allá de su función enzimática, Lipin-1 puede influir en programas transcripcionales que regulan la oxidación de lípidos y el metabolismo mitocondrial, integrando el estado nutricional con la expresión de genes metabólicos. La actividad de Lpin1 afecta la diferenciación de adipocitos, el manejo hepático de lípidos y la homeostasis energética del músculo esquelético, y su desregulación se asocia con fenotipos similares a la lipodistrofia, hígado graso, resistencia a la insulina y estrés metabólico inflamatorio en modelos experimentales. Estas funciones hacen de Lipin-1 un nodo clave para estudiar las vías del metabolismo lipídico, el diálogo entre el retículo endoplásmico y la mitocondria, y los mecanismos de enfermedad metabólica.
Lipin-1 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Lpin1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Lpin1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Lpin1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Lpin1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.