Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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LHX4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421427
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LHX4 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico LHX4, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LHX4 Anticorpo (E-10): sc-374562
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LHX4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421427 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Lhx4 codifica a proteína homeobox LIM 4 (LHX4), um fator de transcrição que se liga ao DNA por meio de um homeodomínio e coordena programas de expressão gênica essenciais para a padronização embrionária e a organogênese. No desenvolvimento do camundongo, LHX4 contribui para a especificação e a diferenciação de linhagens da hipófise anterior e para processos mais amplos do desenvolvimento neuronal, ao integrar-se a cofactores de domínio LIM e a redes transcricionais de homeobox. Sua atividade influencia decisões de destino celular, comprometimento de linhagem e a regulação transcricional responsiva a morfógenos durante a formação dos tecidos. A desregulação de vias de desenvolvimento associadas a LHX4 é relevante para pesquisas sobre fenótipos hipofisários e do neurodesenvolvimento, nas quais alterações na dosagem do fator de transcrição podem perturbar a formação de eixos endócrinos e o estabelecimento de circuitos neurais.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO LHX4 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Lhx4 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Lhx4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Lhx4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína LHX4.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Lhx4 para a investigação da sinalização de LHX4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Lhx4 críticos para a função LHX4
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Lhx4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo LHX4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo LHX4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Lhx4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo LHX4 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR LHX4 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Lhx4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Lhx4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.