Plasmide Double Nickase (h) LHX2: sc-401071-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) LHX2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide LHX2 Double Nickase (h) et le plasmide LHX2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant LHX2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: LHX2 Antibody (LHX2A12G1): sc-81311
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) LHX2 | sc-401071-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) LHX2 | sc-401071-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LHX2 code un facteur de transcription à homéoboîte de type LIM qui régule la spécification des lignages, le maintien des progéniteurs et la morphogenèse tissulaire au cours du développement. LHX2 agit via la liaison à l’ADN et des interactions protéiques médiées par les domaines LIM afin de coordonner des programmes transcriptionnels impliqués dans la régulation de la chromatine, les décisions de destinée cellulaire et la différenciation dans des contextes neuronaux, oculaires et hématopoïétiques. Dans les tissus adultes, une expression altérée de LHX2 a été associée à une dérégulation des réseaux de gènes du développement et à des états aberrants de prolifération ou de différenciation. En tant que régulateur dépendant du contexte, LHX2 est fréquemment étudié pour ses rôles en biologie des cellules souches, dans les voies du neurodéveloppement et dans les mécanismes de contrôle transcriptionnel pertinents pour des signatures d’expression génique associées aux maladies.
LHX2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus LHX2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de LHX2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de LHX2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de LHX2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.