Plasmide Double Nickase (h) leupaxin: sc-405101-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) leupaxin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide leupaxin Double Nickase (h) et le plasmide leupaxin Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant LPXN. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: leupaxin Antibody (B-2): sc-376820
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) leupaxin | sc-405101-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) leupaxin | sc-405101-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **LPXN** code la **leupaxine**, une protéine adaptatrice à domaine LIM de la famille de la paxilline, qui se localise aux **adhérences focales** et relie l’engagement des intégrines à la signalisation en aval. Par ses interactions avec des complexes du cytosquelette et de kinases à tyrosine, la leupaxine module l’adhérence cellulaire, la migration et la mécanotransduction, en influençant le renouvellement des adhérences focales et la dynamique de l’actine. La signalisation dépendante de LPXN s’interface avec des voies telles que **FAK/SRC**, la régulation des **GTPases de la famille Rho** et les cascades **MAPK** qui coordonnent la motilité cellulaire et les signaux de survie. Une expression altérée de la leupaxine ou un remodelage des adhérences focales a été associé à des phénotypes cellulaires invasifs en biologie du cancer ainsi qu’à un trafic des cellules immunitaires dérégulé, faisant de **LPXN** un nœud utile pour étudier les mécanismes pathologiques liés à l’adhérence.
leupaxin Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus LPXN dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de LPXN. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de LPXN. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de LPXN.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.