Latrophilin-3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-411703

Descripción general

ADGRL3 codifica la latrofílina-3, un receptor acoplado a proteína G de adhesión (GPCR) enriquecido en el sistema nervioso, que actúa en contactos célula–célula para regular el desarrollo de sinapsis, el crecimiento de neuritas y el ensamblaje de circuitos. A través de sus dominios extracelulares de adhesión y su capacidad de señalización como GPCR, la latrofílina-3 conecta ligandos extracelulares con vías intracelulares que influyen en la remodelación del citoesqueleto, el tráfico vesicular y la conectividad neuronal. Estudios genéticos y funcionales implican a ADGRL3 en fenotipos del neurodesarrollo y neuropsiquiátricos, lo que respalda su utilidad como punto de entrada molecular para desentrañar la organización sináptica y la señalización a nivel de redes. Por lo tanto, la investigación experimental de ADGRL3 es relevante para comprender cómo la señalización de receptores de adhesión tipo GPCR contribuye a la diferenciación neuronal, la excitabilidad y el mantenimiento sináptico.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Latrophilin-3 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ADGRL3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ADGRL3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ADGRL3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Latrophilin-3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ADGRL3 para la investigación de la señalización de Latrophilin-3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de ADGRL3 críticos para la función de Latrophilin-3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ADGRL3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Latrophilin-3 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Latrophilin-3 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ADGRL3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Latrophilin-3 (h) y el plásmido HDR Latrophilin-3 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ADGRL3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ADGRL3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.