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L-type Ca++ CP α1C双切口酶质粒(h) | sc-401062-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
L-type Ca++ CP α1C双切口酶质粒(h2) | sc-401062-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CACNA1C 编码 L 型电压门控 Ca2+ 通道的 α1C 成孔亚基(CaV1.2),该通道介导在可兴奋细胞与非可兴奋细胞中由去极化触发的 Ca2+ 内流。由 CaV1.2 驱动的钙进入将膜电活动与细胞内信号转导相耦联,包括兴奋–收缩耦联、突触整合,以及通过 CaM/CaMK 和钙调神经磷酸酶–NFAT 等通路介导的钙依赖性转录。通道活性通过塑造动作电位动力学及其下游基因表达程序,影响心肌和平滑肌电生理以及神经元可塑性。CACNA1C 的遗传变异或表达/功能失调与心血管表型及神经精神疾病风险相关,因此它是钙信号网络中被广泛研究的关键节点。
L-type Ca++ CP α1C 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CACNA1C 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CACNA1C内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CACNA1C的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CACNA1C基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。