KLRG1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-409220

Übersicht

KLRG1 (Killer-Cell-Lectin-like Receptor G1) ist ein inhibitorischer Rezeptor, der auf Untergruppen humaner NK-Zellen sowie Effektor-/Gedächtnis-T-Zellen exprimiert wird und dort während der Immunüberwachung zur Feinabstimmung von Zytotoxizität und Zytokinproduktion beiträgt. Durch die Bindung an Cadherine wie E‑Cadherin vermittelt KLRG1 inhibitorische Signale, die Aktivierungsschwellen, zelluläre Differenzierung sowie Merkmale von Immunschöpfung und Seneszenz beeinflussen. KLRG1 wird широко als Marker verwendet, um terminal differenzierte Lymphozytenpopulationen zu charakterisieren und antigengetriebene Antworten bei chronischer Infektion, Entzündung und in Tumormikroumgebungen zu verfolgen. Ein fehlregulierter, KLRG1-assoziierter inhibitorischer Tonus ist daher relevant für Studien zu Immunsuppression, Gewebsresidenz und checkpoint-ähnlichen Signalwegen, die die antivirale und antitumorale Immunität prägen.

Das KLRG1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des KLRG1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des KLRG1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von KLRG1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die KLRG1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von KLRG1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der KLRG1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf KLRG1-Exone abzielen, die für die KLRG1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere KLRG1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom KLRG1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom KLRG1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des KLRG1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das KLRG1 HDR-Plasmid (h) und KLRG1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von KLRG1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten KLRG1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.