KLK7 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-403539

Übersicht

KLK7 kodiert die Kallikrein‑verwandte Peptidase 7, eine sekretierte Serinprotease, die zur epidermalen Homöostase beiträgt, indem sie Komponenten des Stratum corneum verarbeitet und die Desquamation moduliert. KLK7 ist an extrazellulären proteolytischen Kaskaden beteiligt und kann die Barrierefunktion, die Zell‑Zell‑Adhäsion und die inflammatorische Signalübertragung beeinflussen, indem es Proteinsubstrate in der Mikroumgebung der Haut kontrolliert spaltet. Eine fehlregulierte KLK7‑Expression oder ‑Aktivität wurde mit kutanen Entzündungen und Barrieredefekten in Verbindung gebracht und wird häufig im Kontext epithelialer Malignome untersucht, in denen perizelluläre Proteolyse Invasions‑assoziierte Phänotypen beeinflussen kann. Daher wird KLK7 häufig in Signalwegen untersucht, die Proteaseaktivität mit Differenzierung, Zytokinnetzwerken und Umbau der extrazellulären Matrix verknüpfen.

Das KLK7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des KLK7-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des KLK7-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von KLK7 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die KLK7-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von KLK7-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der KLK7-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf KLK7-Exone abzielen, die für die KLK7-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere KLK7-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom KLK7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom KLK7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des KLK7-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das KLK7 HDR-Plasmid (h) und KLK7 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von KLK7-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten KLK7-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.