KIFC1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405597

概要

KIFC1は、微小管のマイナス端方向へ移動するC末端型のキネシン14ファミリー運動タンパク質をコードしており、有糸分裂紡錘体の構築、中心体クラスタリング、そして正確な染色体分配に寄与します。微小管ダイナミクスと紡錘体極の完全性を制御することにより、KIFC1は細胞周期制御や有糸分裂ストレス応答と連携し、増殖能やゲノム安定性を左右します。KIFC1活性の破綻は、異常な有糸分裂、異数性、ならびに中心体増幅を起こした細胞の生存性の変化と関連づけられてきました。これらの特徴により、KIFC1はヒト細胞における紡錘体組立、染色体不安定性、微小管依存的輸送の機構を研究する上で有用な結節点（ターゲット）となります。

KIFC1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるKIFC1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、KIFC1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、KIFC1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、KIFC1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、KIFC1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、KIFC1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• KIFC1の機能に不可欠なKIFC1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、KIFC1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• KIFC1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびKIFC1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、KIFC1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  KIFC1 HDRプラスミド（h）および KIFC1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはKIFC1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のKIFC1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。