KIAA0319L Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-413301
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- KIAA0319L El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico KIAA0319L, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
KIAA0319L Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-413301 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
KIAA0319L codifica una proteína transmembrana enriquecida en la superficie celular y en compartimentos endosomales, estudiada con frecuencia por su papel en la adhesión celular, el tráfico vesicular y la endocitosis mediada por receptores. Se considera funcionalmente relacionada con miembros de la familia KIAA0319 implicados en procesos del neurodesarrollo, incluida la migración neuronal y la organización cortical. Estudios celulares asocian KIAA0319L con la dinámica de membranas y con vías de clasificación intracelular que influyen en la señalización y en las interacciones célula–célula. Evidencia genética y funcional ha vinculado variaciones en este locus con fenotipos del neurodesarrollo, lo que respalda su uso como diana en modelos mecanísticos del desarrollo cerebral y de comportamientos celulares relevantes para la enfermedad.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO KIAA0319L (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen KIAA0319L en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del KIAA0319L junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de KIAA0319L tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína KIAA0319L.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en KIAA0319L para la investigación de la señalización de KIAA0319L, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de KIAA0319L críticos para la función de KIAA0319L
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de KIAA0319L para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido KIAA0319L CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido KIAA0319L CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus KIAA0319L. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR KIAA0319L (h) y el plásmido HDR KIAA0319L (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología KIAA0319L para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana KIAA0319L definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.