Plásmido Doble Nickase (m) KCTD5: sc-427353-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)KCTD5 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa KCTD5 (m) y el plásmido de doble nickasa KCTD5 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Kctd5. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) KCTD5 | sc-427353-NIC | 20 µg | $410.00 |
El gen Kctd5 de ratón codifica KCTD5, una proteína que contiene un dominio BTB/POZ y que funciona como adaptador en complejos de ligasa E3 de ubiquitina tipo cullin-RING, apoyando el reconocimiento de sustratos y el recambio de proteínas dependiente de ubiquitina. A través de la regulación de la proteostasis, KCTD5 puede influir en la progresión del ciclo celular, la transducción de señales y procesos sinápticos o neuronales al modular la estabilidad de componentes de distintas vías. La actividad alterada de la vía ubiquitina–proteasoma es ampliamente relevante para fenotipos del neurodesarrollo y para la reorganización de la señalización asociada al cáncer, lo que hace de Kctd5 un nodo útil para estudios mecanísticos del control de calidad proteico. En sistemas de modelos murinos, la perturbación de Kctd5 ayuda a investigar cómo la ubiquitinación se integra con respuestas al estrés celular y programas de diferenciación.
KCTD5 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Kctd5 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Kctd5. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Kctd5. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Kctd5 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.