JNK1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (bovine): sc-437283

Übersicht

JNK1 (MAPK8) ist eine stressaktivierte mitogenaktivierte Proteinkinase (MAPK), die vorgelagerte Signale von Zytokinen, Wachstumsfaktoren, reaktiven Sauerstoffspezies und DNA-Schäden integriert, um über Zielproteine wie c-Jun und andere AP-1-Komponenten transkriptionelle Programme zu regulieren. In bovinen Zellen trägt JNK1 zur Steuerung von Apoptose, inflammatorischer Signalübertragung und Differenzierung bei, indem es MAPK-Kaskaden koordiniert, die mit NF-κB, der Insulinsignalgebung und TGF-β-assoziierten Antworten verknüpft sind. Die Aktivität von JNK1 beeinflusst zelluläre Ergebnisse wie Proliferation, Migration und den Umbau der extrazellulären Matrix und ist damit relevant für Modelle von Gewebestress, metabolischer Dysregulation und Immunaktivierung. Eine fehlregulierte JNK-Signalgebung wurde breit mit entzündlichen und degenerativen Pathologien in Verbindung gebracht, was seine Eignung als mechanistischer Knotenpunkt in der fokussierten Signalwegforschung unterstreicht.

Das JNK1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (bovine) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des -Gens in bovine-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des -Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die JNK1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von -defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der JNK1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf -Exone abzielen, die für die JNK1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere -Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom JNK1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (bovine) und vom JNK1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (bovine2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des -Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das JNK1 HDR-Plasmid (bovine) und JNK1 HDR-Plasmid (bovine2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von -Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten -Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.