Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
JIP-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401634
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- JIP-1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico JIP-1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: JIP-1 Anticuerpo (2J8): sc-53552
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
JIP-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401634 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
MAPK8IP1 codifica JIP-1 (proteína 1 que interactúa con JNK), una proteína andamiaje neuronal que organiza módulos de MAPK al coordinar MAP3K, MKK7 y JNK (MAPK8) para modular la amplitud y la localización de la señalización activada por estrés. JIP-1 también se acopla a la maquinaria de transporte axonal y contribuye al tráfico polarizado y al crecimiento de neuritas, conectando la transducción de señales con la dinámica del citoesqueleto y el movimiento de cargas. Mediante la modulación de programas transcripcionales y apoptóticos dependientes de JNK, MAPK8IP1 se ha investigado en contextos de neurodegeneración, respuestas neuronales a lesiones y vías de estrés metabólico. Una andamiaje de JIP-1 desregulado puede alterar la especificidad de las quinasas y la expresión génica aguas abajo, lo que lo convierte en un nodo útil para desentrañar el cableado de la vía MAPK en modelos celulares humanos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO JIP-1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MAPK8IP1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MAPK8IP1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MAPK8IP1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína JIP-1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MAPK8IP1 para la investigación de la señalización de JIP-1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de MAPK8IP1 críticos para la función de JIP-1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MAPK8IP1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido JIP-1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido JIP-1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MAPK8IP1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR JIP-1 (h) y el plásmido HDR JIP-1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MAPK8IP1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MAPK8IP1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.