ISGF-3γ p48CRISPR激活质粒(h): sc-400958-ACT

IRF9 编码 ISGF-3γ p48，是干扰素刺激基因因子 3（ISGF3）复合体中必需的 DNA 结合组分。该复合体与 STAT1 和 STAT2 协同作用，将 I 型干扰素信号转化为特定的转录程序。在 IFN-α/β 刺激后，ISGF3 与干扰素刺激反应元件（ISRE）结合，诱导抗病毒限制因子、抗原呈递相关机制以及先天免疫调节因子的表达，这些都是 JAK–STAT 通路输出的核心内容。IRF9 的活性决定细胞对病毒感染与炎症信号的应答方式；而干扰素刺激基因网络的失调与免疫失衡及干扰素驱动的病理过程有关。作为一个枢纽型转录调控因子，IRF9 常被用于研究宿主–病原体相互作用、细胞因子信号串扰以及先天免疫的转录调控。

ISGF-3γ p48 CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性IRF9的表达。

ISGF-3γ p48 CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的IRF9基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。

在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于IRF9转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性ISGF-3γ p48表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的IRF9位点，并能够研究内源性位点上依赖于ISGF-3γ p48的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在IRF9表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟ISGF-3γ p48通路恢复的宝贵工具。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。