IRX5 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404838
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- IRX5 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico IRX5, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: IRX5 Anticuerpo (IRX5C10G5): sc-81102
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
IRX5 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404838 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
IRX5 codifica la proteína homeobox Iroquois 5, un factor de transcripción específico de secuencia que regula el patrón del desarrollo y las decisiones de destino celular mediante el control de programas de expresión génica. En células humanas, la actividad de IRX5 contribuye a la especificación de linajes, la morfogénesis tisular y el mantenimiento de estados diferenciados al modular redes transcripcionales que se entrecruzan con vías de señalización del desarrollo. La expresión desregulada de IRX5 se ha relacionado con fenotipos proliferativos y de diferenciación alterados, lo que respalda su relevancia para estudios de biología tumoral y trastornos del desarrollo. Como regulador nuclear, IRX5 se investiga habitualmente por su impacto en el control transcripcional asociado a la cromatina y en la configuración de vías downstream.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO IRX5 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen IRX5 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del IRX5 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de IRX5 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína IRX5.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en IRX5 para la investigación de la señalización de IRX5, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de IRX5 críticos para la función de IRX5
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de IRX5 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido IRX5 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido IRX5 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus IRX5. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR IRX5 (h) y el plásmido HDR IRX5 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología IRX5 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana IRX5 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.