Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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IQGAP1 Double Nickase Plasmid (m): sc-424375-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das IQGAP1 Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- IQGAP1 Double-Nickase-Plasmid (m) und IQGAP1 Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Iqgap1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: IQGAP1: sc-376021
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
IQGAP1 Double Nickase Plasmid (m) | sc-424375-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IQGAP1 Double Nickase Plasmid (m2) | sc-424375-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Mouse Iqgap1 kodiert IQGAP1, ein Multidomänen-Scaffoldprotein, das den Umbau des Aktinzytoskeletts mit Membrantransport und Signaltransduktion koordiniert. IQGAP1 bindet kleine GTPasen wie CDC42 und RAC1 und interagiert mit β-Catenin, Calmodulin und MAPK-Komponenten, um Zellpolarität, Adhäsion, Migration und Zytokinese zu regulieren. Über diese Interaktionen trägt es dazu bei, Signalwege zu integrieren, die die Stabilität von Zellkontakten und dynamische Zytoskelettumlagerungen steuern – Prozesse, die häufig in der Gewebemorphogenese und der Motilität von Immunzellen untersucht werden. Fehlregulierte IQGAP1-assoziierte Signalgebung und veränderte Programme der Zell-Zell-Adhäsion werden häufig in Modellen für Entzündung, Fibrose und krebsassoziierte Phänotypen untersucht, was seine Relevanz für die Erforschung von Krankheitsmechanismen unterstreicht.
IQGAP1 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Iqgap1-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Iqgap1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Iqgap1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Iqgap1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.