Plasmide Double Nickase (h) Integrin β6/ITGB6: sc-400999-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Integrin β6/ITGB6 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Integrin β6/ITGB6 Double Nickase (h) et le plasmide Integrin β6/ITGB6 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ITGB6. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Integrin β6/ITGB6 Antibody (C5): sc-517598
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Integrin β6/ITGB6 | sc-400999-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Integrin β6/ITGB6 | sc-400999-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ITGB6 code la sous-unité intégrine β6, qui s’associe à l’intégrine αv pour former l’hétérodimère αvβ6, restreint aux épithéliums, un médiateur clé de l’adhésion cellule–MEC et de la mécanotransduction. αvβ6 se lie à des ligands contenant le motif RGD, tels que la fibronectine et la vitronectine, et peut activer le TGF-β latent via une interaction avec le complexe LAP, reliant ainsi ITGB6 à la signalisation TGF-β/SMAD, au remodelage épithélial et au dialogue immuno–stromal. Par l’assemblage des adhérences focales et l’activation de voies en aval, notamment FAK/SRC, MAPK et PI3K, ITGB6 influence la migration, l’invasion et les programmes de réparation tissulaire. Une expression dérégulée d’ITGB6 a été associée à la fibrose, à l’inflammation chronique et à plusieurs cancers épithéliaux, où elle est souvent étudiée comme un moteur de phénotypes invasifs et de la signalisation du microenvironnement.
Integrin β6/ITGB6 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ITGB6 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ITGB6. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ITGB6. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ITGB6.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.