Plasmide Double Nickase (m) Integrin α1/ITGA1/CD49a: sc-430957-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Integrin α1/ITGA1/CD49a correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Integrin α1/ITGA1/CD49a Double Nickase (m) et le plasmide Integrin α1/ITGA1/CD49a Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Itga1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Integrin α1/ITGA1/CD49a Antibody (A-9): sc-271034
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Integrin α1/ITGA1/CD49a | sc-430957-NIC | 20 µg | $410.00 |
Itga1 code l’intégrine α1 (ITGA1/CD49a), une sous-unité α qui s’associe à β1 pour former le récepteur du collagène/de la laminine α1β1, reliant l’engagement de la matrice extracellulaire à la signalisation intracellulaire et au remodelage du cytosquelette. L’adhérence médiée par ITGA1 régule la migration cellulaire, la survie et la mécanotransduction via les complexes d’adhérence focale et des voies en aval telles que FAK/Src, MAPK/ERK et PI3K/AKT, tout en influençant l’organisation tissulaire et les interactions entre cellules inflammatoires et matrice. Dans des modèles murins, une fonction Itga1 altérée a été associée à une dérégulation du trafic leucocytaire, à un remodelage matriciel lié à la fibrose, ainsi qu’à des modifications dépendantes du contexte de l’invasion tumorale et de la biologie du stroma. Ces rôles font d’ITGA1 une cible utile pour étudier la perception de la matrice extracellulaire, la rétention des cellules immunitaires et la signalisation induite par le collagène dans des microenvironnements pertinents pour le développement et les maladies.
Integrin α1/ITGA1/CD49a Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Itga1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Itga1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Itga1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Itga1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.