IL-27Rα CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-424540

Übersicht

Il27ra kodiert die Alpha-Kette des murinen Interleukin-27-Rezeptors (IL-27Rα, auch als WSX-1 bekannt), eine Zytokinrezeptor-Untereinheit, die zusammen mit gp130 einen funktionsfähigen IL-27-Rezeptorkomplex bildet. Die Signalübertragung über IL-27Rα aktiviert JAK/STAT-Signalwege, insbesondere STAT1 und STAT3, und beeinflusst dadurch die Differenzierung von T-Zellen, moduliert Th1- und Th17-assoziierte Entzündungsprogramme und wirkt sich auf die Zytokinproduktion in mehreren Immunzelltypen aus. Über diese Prozesse trägt IL-27Rα zur Regulation der Immunhomöostase, antigengetriebener Antworten und zur Rückkopplungskontrolle von Entzündungen bei. Eine fehlregulierte IL-27/IL-27Rα-Signalgebung wurde in Modellen autoimmuner Pathologie, chronischer Entzündung sowie infektionsbedingter Immundysfunktion beschrieben, was ihre Eignung als mechanistischer Knotenpunkt in der immunologischen Forschung unterstreicht.

Das IL-27Rα CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Il27ra-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Il27ra-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Il27ra nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die IL-27Rα-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Il27ra-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der IL-27Rα-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Il27ra-Exone abzielen, die für die IL-27Rα-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Il27ra-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom IL-27Rα CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom IL-27Rα CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Il27ra-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das IL-27Rα HDR-Plasmid (m) und IL-27Rα HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Il27ra-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Il27ra-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.