IL-27Rα CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-405846
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- IL-27Rα Das CRISPR/Cas9-Knockout (KO)-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, von denen jedes für die Cas9-Nuklease und eine zielspezifische 20-nt-Guide-RNA (gRNA) kodiert, die für maximale Knockout-Effizienz unter Verwendung von Sequenzen aus der GeCKO v2-Bibliothek entwickelt wurde
- gRNA-Sequenzen lenken Cas9 so, dass es ortsspezifische Doppelstrangbrüche (DSBs) im IL-27Rα-Genomlokus induziert, was zu einem Gen-Knockout durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) führt
- Die Puromycin-Resistenz- und RFP-Gene werden von LoxP-Stellen flankiert, was die Entfernung der Selektionsmarker mittels Cre-Rekombinase (Cre-Vektor: sc-418923) nach der Etablierung stabiler Knockout-Zelllinien ermöglicht
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: IL-27Rα: sc-376309
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
IL-27Rα CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) | sc-405846 | 20 µg | $397.00 |
Übersicht
IL27RA kodiert die Interleukin-27-Rezeptor-α-Kette (IL-27Rα, auch bekannt als WSX-1/TCCR), eine Zytokinrezeptor-Untereinheit, die zusammen mit gp130 einen Signalübertragungskomplex bildet und so die Antworten auf IL-27 vermittelt. Die Bindung an IL-27Rα aktiviert JAK/STAT-Signalwege, insbesondere STAT1 und STAT3, und beeinflusst dadurch die Differenzierung von T-Zellen, begrenzt überschießende Entzündungsreaktionen und moduliert die Funktion antigenpräsentierender Zellen. Die IL27RA-abhängige Signalgebung wirkt sich auf das Th1/Th17-Gleichgewicht, regulatorische Netzwerke und interferonresponsive Genprogramme aus, die die Wechselwirkung zwischen angeborener und adaptiver Immunität mitprägen. Eine Fehlregulation dieser Achse wurde mit immunvermittelter Pathologie und veränderter Wirtsabwehr in Verbindung gebracht, wodurch IL27RA ein nützliches Ziel für mechanistische Studien in Modellen entzündlicher und infektiöser Erkrankungen ist.
Das IL-27Rα CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des IL27RA-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des IL27RA-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.
Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von IL27RA nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die IL-27Rα-Proteinexpression aufheben.
Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von IL27RA-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der IL-27Rα-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.
Hauptmerkmale
- sgRNAs, die auf IL27RA-Exone abzielen, die für die IL-27Rα-Funktion entscheidend sind
Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
Pool von Plasmiden, die auf mehrere IL27RA-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion
Designvarianten
CRISPRs +/- HDRs
- gRNAs, die vom IL-27Rα CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom IL-27Rα CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des IL27RA-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das IL-27Rα HDR-Plasmid (h) und IL-27Rα HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von IL27RA-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten IL27RA-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.