IL-1RII Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m2): sc-421099-KO-2

Descripción general

Il1r2 codifica el receptor de interleucina 1 tipo II (IL-1RII) de ratón, un receptor señuelo de alta afinidad que se une a IL-1α e IL-1β y atenúa la señalización proinflamatoria al limitar la disponibilidad del ligando para la transducción de señales mediada por IL-1R1/IL-1RAcP. Al reducir la activación impulsada por IL-1 de las vías de NF-κB y MAPK, IL-1RII contribuye a modular las redes de citocinas, el reclutamiento de leucocitos y la activación de la inmunidad innata en los compartimentos mieloide y estromal. La regulación alterada de IL-1RII se ha vinculado a fenotipos inflamatorios y autoinmunes a través de efectos sobre el equilibrio de citocinas y el tono inflamatorio tisular. Por ello, Il1r2 se utiliza para investigar los mecanismos que controlan la respuesta a IL-1, la biología de los receptores señuelo y la resolución frente a la persistencia de la inflamación en modelos murinos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO IL-1RII (m2) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Il1r2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Il1r2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Il1r2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína IL-1RII.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Il1r2 para la investigación de la señalización de IL-1RII, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Il1r2 críticos para la función de IL-1RII
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Il1r2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido IL-1RII CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido IL-1RII CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Il1r2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR IL-1RII (m) y el plásmido HDR IL-1RII (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Il1r2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Il1r2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.