Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) IL-15Rα: sc-416909-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) IL-15Rα correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide IL-15Rα Double Nickase (h) et le plasmide IL-15Rα Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant IL15RA. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: IL-15Rα Antibody (G-3): sc-374023
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) IL-15Rα | sc-416909-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) IL-15Rα | sc-416909-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
L’IL15RA humain code la chaîne alpha du récepteur de l’interleukine‑15 (IL‑15Rα), un composant de liaison à haute affinité qui capte l’IL‑15 et la présente en trans à des cellules exprimant IL‑2/IL‑15Rβ et la chaîne γ commune. Ce complexe récepteur active une signalisation dépendante de JAK1/JAK3, avec l’activation en aval de STAT5 ainsi que l’engagement des voies PI3K‑AKT et MAPK, modulant la survie, la prolifération et la différenciation effectrice des lymphocytes. IL‑15Rα est au cœur de l’homéostasie des cellules NK et des lymphocytes T CD8+ mémoire, et influence la dynamique des réseaux cytokiniques au sein des tissus inflammés. Une expression ou une signalisation d’IL15RA dérégulée a été associée à des pathologies à médiation immunitaire et à une surveillance immunitaire altérée dans des contextes inflammatoires et oncologiques, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques de l’immunité pilotée par les cytokines.
IL-15Rα Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus IL15RA dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de IL15RA. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de IL15RA. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de IL15RA.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.