Plásmido Doble Nickase (h) IL-10Rβ: sc-404666-NIC

IL10RB codifica la subunidad beta del receptor de interleucina 10 (IL-10Rβ), una cadena accesoria esencial compartida por múltiples receptores de citocinas de clase II, incluidos los de IL-10, IL-22, IL-26 y los interferones de tipo III (IFN-λ). Tras la unión del ligando, IL-10Rβ se asocia con la subunidad alfa correspondiente, específica del ligando, para facilitar la activación de JAK1/TYK2 y la señalización posterior mediada por STAT, configurando programas transcripcionales que regulan la inflamación, la función de la barrera epitelial y las respuestas antivirales. Por ello, esta subunidad del receptor es fundamental para la homeostasis inmunitaria impulsada por citocinas en superficies mucosas y en compartimentos mieloides y linfoides. La alteración de la señalización dependiente de IL10RB se estudia con frecuencia en el contexto de respuestas de citocinas desreguladas relevantes para la biología de las infecciones, la patología inflamatoria y los mecanismos inmunomediados.

IL-10Rβ El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus IL10RB en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de IL10RB. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de IL10RB. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con IL10RB alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.