Plásmido Doble Nickase (m) IKKβ: sc-421074-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)IKKβ consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa IKKβ (m) y el plásmido de doble nickasa IKKβ (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Ikbkb. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) IKKβ | sc-421074-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) IKKβ | sc-421074-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Ikbkb codifica la subunidad catalítica IKKβ (IKKβ), un componente central del complejo IKK que fosforila las proteínas IκB para promover su ubiquitinación y degradación, lo que permite la translocación nuclear de NF-κB y las respuestas transcripcionales. A través de la señalización canónica de NF-κB, IKKβ integra señales procedentes de receptores de citocinas como TNFR e IL-1R, receptores de reconocimiento de patrones y vías de estrés celular para regular la inflamación, la inmunidad innata y programas de supervivencia. La actividad desregulada de IKKβ se utiliza ampliamente como punto de entrada molecular para estudiar la señalización inflamatoria crónica, los estados de activación de células inmunitarias y redes transcripcionales adaptativas al estrés en modelos murinos. La perturbación de Ikbkb también es relevante para investigaciones mecanísticas sobre inflamación oncogénica, disfunción metabólica y procesos neuroinflamatorios en los que el tono de la vía NF-κB moldea los fenotipos celulares.
IKKβ El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Ikbkb en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Ikbkb. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Ikbkb. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Ikbkb alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.