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IGFBP3慢病毒激活颗粒(h) | sc-400682-LAC | 200 µl | $455.00 |
IGFBP3(胰岛素样生长因子结合蛋白3)是一种分泌型调控蛋白,可高亲和力结合 IGF‑I 和 IGF‑II,从而调节 IGF 的生物可利用性、与受体的结合以及下游 PI3K–AKT 和 MAPK 信号传导。除通过“封存”IGF 之外,IGFBP3 还可通过与细胞外基质成分以及细胞表面或细胞核内相互作用伙伴进行情境依赖性的互作,参与细胞周期控制、凋亡、细胞衰老和应激反应。其表达受激素与炎症信号的动态调控,并且在肿瘤生物学、代谢失衡和组织重塑等背景中常发生改变。这些特性使 IGFBP3 成为在人类细胞中解析生长因子信号、增殖调控以及依赖微环境的表型的一个有用关键节点。
IGFBP3 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 IGFBP3 表达。
IGFBP3 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在IGFBP3转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性IGFBP3表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 IGFBP3 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。