Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Ig J Chain Double Nickase Plasmid (h): sc-403642-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Ig J Chain Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Ig J Chain Double-Nickase-Plasmid (h) und Ig J Chain Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf JCHAIN abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Ig J chain: sc-133177
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Ig J Chain Double Nickase Plasmid (h) | sc-403642-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Ig J Chain Double Nickase Plasmid (h2) | sc-403642-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
JCHAIN kodiert die Immunglobulin‑J‑Kette, ein kleines sezerniertes Polypeptid, das die Polymerisierung von IgA und IgM ermöglicht, indem es Fc‑Regionen miteinander verknüpft und so die Bildung von dimerem IgA und pentamerem IgM fördert. Diese Polymerisierung unterstützt die mukosale Immunität sowie den effizienten Transport polymerer Immunglobuline über Epithelien durch den polymeren Immunglobulinrezeptor und ist in Programme der B‑Zell‑Differenzierung und der Sekretionsaktivität von Plasmazellen eingebunden. Die JCHAIN‑Expression ist eng an Zustände antikörpersekretierender Zellen und an Klassenwechsel‑Ergebnisse gekoppelt und liefert damit einen funktionellen Readout der Reifung der humoralen Immunantwort. Dysregulierte JCHAIN‑Spiegel wurden mit veränderter Schleimhautabwehr, Immundyskrasien und B‑zell‑abgeleiteten Malignomen in Verbindung gebracht, bei denen Produktion und Sekretionswege von Immunglobulinen gestört sind.
Ig J Chain Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des JCHAIN-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von JCHAIN abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die JCHAIN-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit JCHAIN-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.