Plasmide Double Nickase (h) I-FABP: sc-416794-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) I-FABP correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide I-FABP Double Nickase (h) et le plasmide I-FABP Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FABP2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: I-FABP Antibody (E-9): sc-374482
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) I-FABP | sc-416794-NIC | 20 µg | $410.00 |
La protéine 2 de liaison aux acides gras (FABP2) code la protéine intestinale de liaison aux acides gras (I-FABP), un chaperon lipidique cytosolique fortement enrichi dans les entérocytes de l’intestin grêle. I-FABP se lie aux acides gras à longue chaîne ainsi qu’à d’autres ligands hydrophobes afin de faciliter leur trafic intracellulaire vers la β‑oxydation, la synthèse des triglycérides et le remodelage membranaire, ce qui la relie à des voies coordonnant l’absorption des nutriments et l’homéostasie lipidique. Par son rôle dans la prise en charge des lipides alimentaires et le maintien de l’équilibre métabolique de l’épithélium, FABP2 est fréquemment étudiée dans le contexte de la physiologie de la barrière intestinale, du stress épithélial lié à l’inflammation et de la dérégulation lipidique associée aux maladies métaboliques. Une activité ou une expression modifiée de FABP2 a été utilisée comme indicateur moléculaire de l’atteinte des entérocytes et d’une perméabilité intestinale perturbée dans des systèmes expérimentaux.
I-FABP Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FABP2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FABP2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FABP2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FABP2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.