HSP 40 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-402810

개요

DNAJB1은 인간 HSP40 공보조샤페론(co-chaperone; DnaJ homolog subfamily B member 1)을 암호화하며, HSP70의 ATPase 활성을 촉진해 잘못 접힌(client) 단백질의 접힘, 재접힘, 그리고 품질 관리(선별·처리)를 돕는 프로테오스타시스의 핵심 조절자입니다. HSP70과의 J-도메인 의존적 상호작용을 통해 HSP40은 세포질 단백질 품질 관리와 스트레스 반응을 지원하고, 프로테아좀 및 자가포식 연관 경로를 통한 샤페론 보조 분해를 조율합니다. DNAJB1 기능은 열충격을 비롯한 다양한 단백질 독성(proteotoxic) 스트레스 상황에서의 세포 회복탄력성과 관련이 있으며, 변화된 샤페론 네트워크는 단백질 응집 질환과 종양성 스트레스 적응에 흔히 연관됩니다. DNAJB1과 관련된 반복적 질병 연관 사건으로는 섬유층판암(fibrolamellar carcinoma)에서 관찰되는 DNAJB1–PRKACA 융합이 있으며, 이는 정의된 유전적 맥락에서 샤페론 생물학을 연구하기 위한 DNAJB1 중심 모델의 가치를 부각합니다.

HSP 40 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 DNAJB1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 DNAJB1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 DNAJB1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 HSP 40 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 HSP 40 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 DNAJB1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• HSP 40 기능에 중요한 DNAJB1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 DNAJB1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• HSP 40 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 HSP 40 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 DNAJB1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  HSP 40 HDR 플라스미드 (h) 및 HSP 40 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 DNAJB1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 DNAJB1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.