Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Plásmido Doble Nickase (m) HSF1: sc-420971-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)HSF1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa HSF1 (m) y el plásmido de doble nickasa HSF1 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Hsf1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: HSF1 Anticuerpo (E-4): sc-17757
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) HSF1 | sc-420971-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) HSF1 | sc-420971-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El factor de choque térmico 1 (HSF1), codificado por el gen Hsf1 del ratón, es un regulador maestro de la transcripción de la respuesta al choque térmico que mantiene la proteostasis durante el estrés térmico y proteotóxico. Tras su activación, HSF1 se trimeriza y se une a elementos de choque térmico para inducir chaperonas moleculares como HSP70 y HSP90, coordinando el plegamiento proteico, el control de calidad y la recuperación del daño celular. HSF1 se integra con vías que controlan la homeostasis de proteínas, la autofagia, la apoptosis y la adaptación metabólica, modulando la supervivencia celular bajo estrés. La actividad desregulada de HSF1 se ha vinculado a procesos relevantes para la neurodegeneración, el envejecimiento, la inflamación y programas de estrés asociados al cáncer, lo que lo convierte en un nodo clave para estudios mecanísticos en modelos murinos.
HSF1 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Hsf1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Hsf1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Hsf1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Hsf1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.