HSF1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h2): sc-400432-KO-2

개요

열충격 인자 1(HSF1)은 HSP70 및 HSP90 계열 구성원을 포함한 샤페론과 단백질 항상성(proteostasis) 관련 유전자의 발현을 유도함으로써, 단백질 접힘을 유지하고 단백질 독성 스트레스(proteotoxic stress)를 제한하는 세포 열충격 반응을 조율하는 핵심 전사 조절자이다. 급성 스트레스 적응을 넘어, HSF1은 프로테아좀 기능, 번역, 대사 상태로부터의 신호를 통합하여 단백질 품질 관리, 세포골격 조직화, 그리고 세포 생존 프로그램에 영향을 미친다. HSF1 활성은 HSP90 의존적 클라이언트 안정화, 자가포식, 스트레스 과립(stress granule) 동역학과 같은 경로들과 교차하며, 세포가 환경적 및 세포내 스트레스 요인에 어떻게 반응하는지를 형성한다. HSF1 신호의 조절 이상은 악성 전환과 종양 유지뿐 아니라 신경퇴행 및 기타 단백질 오접힘 관련 질환과도 연관되어 있어, 기전 연구에서 널리 활용되는 핵심 노드로 여겨진다.

HSF1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)는 human 세포주에서 HSF1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 HSF1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 HSF1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 HSF1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 HSF1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 HSF1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• HSF1 기능에 중요한 HSF1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 HSF1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• HSF1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 HSF1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 HSF1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  HSF1 HDR 플라스미드 (h) 및 HSF1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 HSF1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 HSF1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.