Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide Double Nickase (h) HPS-1: sc-404200-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) HPS-1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide HPS-1 Double Nickase (h) et le plasmide HPS-1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant HPS1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: HPS-1 Antibody (5G12G2): sc-101435
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) HPS-1 | sc-404200-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) HPS-1 | sc-404200-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HPS1 code pour HPS-1, un composant central du complexe BLOC-3 (biogenesis of lysosome-related organelles complex-3), impliqué dans le trafic endosomal et la maturation des organites apparentés aux lysosomes. En partenariat avec HPS4, HPS-1 soutient des processus de transport membranaire dépendants des GTPases Rab, qui influencent le tri des cargos, l’identité des organites et la dynamique vésiculaire dans les cellules pigmentaires, les plaquettes et les lignées immunitaires. L’altération de HPS1 perturbe les voies lysosomales et mélanosomales, affectant la biogenèse des organites et le trafic intracellulaire des protéines. Des variants de HPS1 sont associés au syndrome d’Hermansky–Pudlak, établissant un lien entre le dysfonctionnement de BLOC-3 et des défauts de pigmentation, de formation des granules denses plaquettaires et, plus largement, de l’homéostasie des organites apparentés aux lysosomes.
HPS-1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HPS1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HPS1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HPS1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HPS1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.