Plasmide Double Nickase (h) HoxC8: sc-405407-NIC

HOXC8 code le facteur de transcription à homéoboîte HoxC8, un régulateur se liant à l’ADN de manière spécifique à la séquence, qui contribue à l’organisation de l’axe antéro‑postérieur au cours de l’embryogenèse et guide des programmes de différenciation dans les tissus d’origine mésodermique et dérivés de la crête neurale. HoxC8 module des réseaux de gènes contrôlant les choix de destinée cellulaire, la morphogenèse et des programmes transcriptionnels spécifiques des tissus via des interactions HOX‑cofacteurs et une régulation dépendante de la chromatine. Une expression dérégulée de HOXC8 a été rapportée dans de nombreux types de tumeurs et est associée à des états transcriptionnels altérés liés à la prolifération, à la migration et à la transition épithélio‑mésenchymateuse, ce qui en fait un nœud pertinent pour étudier la reprogrammation développementale et la signalisation oncogénique. De plus, l’activité de HOXC8 recoupe des voies impliquées dans le remodelage de la matrice extracellulaire et la spécification de lignée, soutenant des études mécanistiques en développement, en biologie du cancer et en régulation transcriptionnelle.

HoxC8 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HOXC8 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HOXC8. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HOXC8. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HOXC8.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.