HoxB4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404013

Descripción general

HOXB4 codifica el factor de transcripción homeobox HoxB4, un regulador de unión al ADN específico de secuencia que ayuda a establecer la organización anteroposterior durante el desarrollo y controla programas de especificación de linaje en compartimentos hematopoyéticos y otros compartimentos de progenitores. La actividad de HoxB4 coordina redes transcripcionales que gobiernan la autorrenovación de células madre/progenitoras, la temporización de la diferenciación y la progresión del ciclo celular, integrándose con vías de señalización del desarrollo más amplias y con rutas de regulación de la cromatina. Se ha reportado expresión desregulada de HOXB4 en contextos de neoplasias hematológicas, y con frecuencia se estudia como parte de la circuitería reguladora del clúster HOX, la arquitectura potenciador–promotor y el control epigenético de la identidad celular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO HoxB4 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen HOXB4 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del HOXB4 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de HOXB4 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína HoxB4.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en HOXB4 para la investigación de la señalización de HoxB4, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de HOXB4 críticos para la función de HoxB4
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de HOXB4 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido HoxB4 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido HoxB4 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus HOXB4. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR HoxB4 (h) y el plásmido HDR HoxB4 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología HOXB4 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana HOXB4 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.