Plásmido Doble Nickase (h) HoxA5: sc-402499-NIC

HOXA5 codifica el factor de transcripción homeobox HoxA5, un regulador de unión al ADN específico de secuencia que ayuda a establecer el patrón anteroposterior y coordina programas de diferenciación celular durante el desarrollo. En tejidos adultos, HoxA5 influye en redes transcripcionales que controlan el estado epitelio‑mesenquimatoso, la organización de la matriz extracelular y respuestas del ciclo celular y de apoptosis dependientes del contexto. Como parte de los circuitos reguladores de los genes HOX, se integra con la cromatina y con vías que especifican linajes para moldear la identidad tisular y la remodelación. La expresión desregulada de HOXA5 o su silenciamiento epigenético se han asociado con estados de diferenciación alterados y con reprogramación transcripcional asociada a tumores en diversos contextos tisulares, lo que respalda su uso como nodo mecanístico en investigación con modelos de enfermedad.

HoxA5 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HOXA5 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HOXA5. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HOXA5. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HOXA5 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.