Plasmide Double Nickase (h) HLA-DRβ1: sc-406727-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) HLA-DRβ1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide HLA-DRβ1 Double Nickase (h) et le plasmide HLA-DRβ1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant HLA-DRB1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) HLA-DRβ1 | sc-406727-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) HLA-DRβ1 | sc-406727-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HLA-DRB1 code la chaîne bêta de l’hétérodimère HLA-DR du CMH de classe II, un médiateur central de l’immunité adaptative qui présente aux lymphocytes T CD4+ des antigènes peptidiques d’origine extracellulaire. L’expression de HLA-DRβ1 et le chargement en peptides dépendent de la voie endosomale de traitement des antigènes, notamment du trafic de la chaîne invariante (CD74) et de l’échange de peptides médié par HLA-DM, ce qui façonne le répertoire des lymphocytes T et leurs seuils d’activation. Les variations ou une régulation altérée de HLA-DRB1 sont fortement associées à la susceptibilité aux maladies à médiation immunitaire et à l’alloréactivité liée aux greffes, reflétant son rôle dans la spécificité antigénique et la tolérance immunitaire. En tant que locus hautement polymorphe, il est largement étudié pour comprendre les mécanismes de l’auto-immunité, des interactions hôte–pathogène et de la dynamique de présentation des antigènes dans les cellules humaines.
HLA-DRβ1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HLA-DRB1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HLA-DRB1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HLA-DRB1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HLA-DRB1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.