Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) Histone H1: sc-404845-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Histone H1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Histone H1 Double Nickase (h) et le plasmide Histone H1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant HIST1H1B. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Histone H1 Antibody (H-2): sc-393358
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Histone H1 | sc-404845-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Histone H1 | sc-404845-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HIST1H1B code l’histone de liaison canonique H1.5 (histone H1), une protéine architecturale clé de la chromatine qui se fixe à l’ADN nucléosomique et favorise une compaction de la chromatine de niveau supérieur. En régulant l’espacement des nucléosomes et l’accessibilité locale, l’histone H1 influence à l’échelle du génome les programmes transcriptionnels, le timing de réplication de l’ADN et la signalisation des dommages à l’ADN au sein des voies associées à la chromatine. Des altérations de la stœchiométrie de H1 ou de la dynamique de sa liaison à la chromatine sont impliquées dans la dérégulation épigénétique observée dans divers cancers et troubles du développement, faisant de HIST1H1B un locus utile pour étudier le contrôle de l’état de la chromatine et la stabilité du génome.
Histone H1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HIST1H1B dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HIST1H1B. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HIST1H1B. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HIST1H1B.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.