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Histone Deacetylase 8 (HDAC8)CRISPR激活质粒(h) | sc-400757-ACT | 20 µg | $397.00 |
HDAC8 编码组蛋白去乙酰化酶 8(histone deacetylase 8),是一种依赖 Zn2+ 的赖氨酸去乙酰化酶,通过从组蛋白及非组蛋白底物上去除乙酰基来调控染色质可及性与转录。通过表观遗传调控,HDAC8 影响多种核心细胞过程,包括细胞周期进程、分化程序以及 DNA 损伤应答,并与染色质重塑和转录调控通路相互交织。HDAC8 活性异常与肿瘤生物学中的基因表达失调以及发育和神经生物学表型相关,因此可作为研究情境特异性表观遗传调控的一个重要节点。对 HDAC8 进行实验性调控有助于阐明去乙酰化动态如何塑造谱系选择与应激适应性转录网络。
Histone Deacetylase 8 (HDAC8) CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性HDAC8的表达。
Histone Deacetylase 8 (HDAC8) CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的HDAC8基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于HDAC8转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性Histone Deacetylase 8 (HDAC8)表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的HDAC8位点,并能够研究内源性位点上依赖于Histone Deacetylase 8 (HDAC8)的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在HDAC8表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Histone Deacetylase 8 (HDAC8)通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。