Plasmide Double Nickase (m) Histone Deacetylase 1 (HDAC1): sc-436647-NIC

Le gène murin *Hdac1* code l’histone désacétylase 1 (HDAC1), une HDAC de classe I qui enlève des groupements acétyle des résidus de lysine situés sur les queues d’histones, favorisant ainsi la compaction de la chromatine et la répression transcriptionnelle. HDAC1 agit au sein de complexes corépresseurs multiprotéiques tels que Sin3, NuRD et CoREST, intégrant des signaux qui régulent la progression du cycle cellulaire, la réplication et la réparation de l’ADN, ainsi que des programmes de différenciation spécifiques de lignée. En coordonnant le silençage épigénétique au niveau des promoteurs et des enhancers, HDAC1 contribue au maintien de la stabilité du génome et façonne les réponses cellulaires au stress et aux signaux du développement. Une activité dérégulée de HDAC1 est fréquemment associée à des programmes transcriptionnels aberrants observés dans divers modèles pertinents pour les maladies, notamment la transformation oncogénique et des phénotypes neurodéveloppementaux.

Histone Deacetylase 1 (HDAC1) Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Hdac1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Hdac1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Hdac1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Hdac1.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.