HIF PHD3 Lentiviral Activation Particles (m): sc-431083-LAC

Egln3 kodiert die hypoxieinduzierbare Faktor‑Prolylhydroxylase 3 (HIF PHD3), eine sauerstoffsensitive Dioxygenase, die HIF‑α‑Untereinheiten hydroxyliert und damit unter Normoxie die VHL‑abhängige Ubiquitinierung und den proteasomalen Abbau fördert. Über die Regulation von HIF‑Transkriptionsprogrammen hilft HIF PHD3, zelluläre Antworten zu koordinieren, darunter angiogene Signalwege, glykolytischer Stoffwechsel, mitochondriale Funktion, Redox‑Homöostase und die Anpassung an sauerstoffarme Mikroumgebungen. In Mausmodellen wird eine veränderte Egln3‑Aktivität широко genutzt, um die Dynamik des Hypoxie‑Signalwegs während Entwicklung und Gewebeumbau zu untersuchen, bei denen die Sauerstoffverfügbarkeit Zellschicksal und Stressantworten prägt. Eine Fehlregulation der HIF–PHD‑Signalgebung wird häufig als mechanistischer Bezugsrahmen in Modellen für Ischämie, Entzündung, Fibrose und Tumorbiologie herangezogen, was Egln3 als einen zentralen Knotenpunkt für signalwegfokussierte Forschung stützt.

HIF PHD3 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Egln3-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

HIF PHD3 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Egln3-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen HIF PHD3-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Egln3-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.