Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Hic-5双切口酶质粒(h): sc-402786-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Hic-5 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Hic-5双切酶质粒（h）和Hic-5双切酶质粒（h2）编码针对TGFB1I1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Hic-5: sc-271353，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Hic-5双切口酶质粒(h) | sc-402786-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Hic-5双切口酶质粒(h2) | sc-402786-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TGFB1I1 编码 Hic-5（亦称 ARA55），这是一种含 LIM 结构域的黏着斑适配蛋白，能够将细胞外基质信号与细胞骨架重塑及转录反应整合起来。Hic-5 定位于黏着斑和细胞核，在这些位置作为支架蛋白组装信号复合体，参与整合素/FAK–SRC 信号传导、Rho 家族 GTP 酶调控以及机械力传导通路，从而协同调控黏附、迁移与应力纤维动力学。Hic-5 可被 TGF-β 诱导，并参与 TGF-β 依赖的重塑程序，包括对上皮–间质转化和成纤维细胞活化的情境特异性影响。TGFB1I1/Hic-5 活性失调与癌细胞侵袭和转移、生物学上的纤维化信号网络以及炎症微环境重塑相关，因此是研究依赖黏附的转录调控的一个有用节点。
Hic-5 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 TGFB1I1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对TGFB1I1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏TGFB1I1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了TGFB1I1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。