Plasmide Double Nickase (h) HCN2: sc-405074-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) HCN2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide HCN2 Double Nickase (h) et le plasmide HCN2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant HCN2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) HCN2 | sc-405074-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) HCN2 | sc-405074-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HCN2 code le canal 2 activé par hyperpolarisation et modulé par les nucléotides cycliques (Hyperpolarization-activated Cyclic Nucleotide–gated channel 2), un canal ionique membranaire qui véhicule le courant Ih/If et contribue à l’activité pacemaker ainsi qu’à l’excitabilité rythmique des neurones et des tissus de conduction cardiaque. L’ouverture du canal est déclenchée par l’hyperpolarisation membranaire et modulée par l’AMPc intracellulaire, reliant HCN2 à la signalisation via les RCPG et l’adénylate cyclase, ainsi qu’au contrôle du potentiel de membrane dépendant de l’activité. En façonnant le potentiel de repos, la résistance d’entrée et les décharges de rebond, HCN2 influence l’intégration synaptique et les oscillations des réseaux dans les cellules excitables. Des altérations de la fonction ou de l’expression de HCN2 ont été associées à des troubles de l’excitabilité, notamment l’épilepsie et des phénotypes de douleur neuropathique, ce qui étaye son intérêt comme cible mécanistique en recherche sur les canaux ioniques et en neurophysiologie.
HCN2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HCN2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HCN2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HCN2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HCN2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.