Plásmido Doble Nickase (h) HAPLN1: sc-403874-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)HAPLN1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa HAPLN1 (h) y el plásmido de doble nickasa HAPLN1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a HAPLN1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) HAPLN1 | sc-403874-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) HAPLN1 | sc-403874-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HAPLN1 (proteína de enlace 1 de hialuronano y proteoglicanos) codifica una glicoproteína de la matriz extracelular que estabiliza los agregados de hialuronano con proteoglicanos de sulfato de condroitina, favoreciendo el ensamblaje de la matriz, su hidratación y la biomecánica tisular. HAPLN1 contribuye a las interacciones célula–matriz y a programas de organización de la MEC que influyen en la adhesión, la migración y la mecanotransducción, especialmente en tejidos conectivos y microambientes tipo cartílago. La alteración de la expresión de HAPLN1 y de su actividad de enlace en la matriz se ha asociado con una remodelación estromal desregulada, vías vinculadas a la fibrosis y cambios en la composición del microambiente tumoral, lo que la convierte en un nodo útil para estudiar la dinámica de la matriz extracelular en modelos de enfermedad humana. Como factor secretado/asociado a la MEC, HAPLN1 se evalúa con frecuencia en estudios de biología de sistemas sobre recambio de la matriz, remodelación inflamatoria y formación de nichos relacionados con la metástasis.
HAPLN1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HAPLN1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HAPLN1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HAPLN1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HAPLN1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.