Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO Gα 15 (h2): sc-403266-KO-2
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Gα 15 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h2) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Gα 15, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Gα 15 Antibody (F-3): sc-393878
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Gα 15 (h2) | sc-403266-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
GNA15 code la sous-unité alpha Gα15 des protéines G hétérotrimériques humaines, un médiateur « promiscu » de la famille Gq qui couple une grande diversité de récepteurs couplés aux protéines G (GPCR) à l’activation de la phospholipase Cβ. Lors de l’engagement du récepteur, Gα15 favorise la signalisation via l’inositol-1,4,5-trisphosphate (IP3) et le diacylglycérol (DAG), la mobilisation du Ca²⁺ intracellulaire, l’activité de la protéine kinase C (PKC) et des programmes transcriptionnels en aval qui modulent la sécrétion, la chimiotaxie et les réponses inflammatoires. Cet axe de signalisation recoupe les voies MAPK et d’autres voies de seconds messagers, influençant les états d’activation cellulaire dans des contextes immunitaires et hématopoïétiques. Des altérations du couplage GPCR–Gα15 et une dérégulation de la signalisation dépendante du calcium ont été impliquées dans des phénotypes associés au cancer et à l’inflammation, ce qui étaye son utilisation dans des études mécanistiques du recâblage des récepteurs et de l’intégration des signaux.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Gα 15 (h2) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène GNA15 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du GNA15, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert GNA15 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Gα 15.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en GNA15 pour l'étude de la signalisation de Gα 15, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de GNA15 essentiels à la fonction de Gα 15
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de GNA15 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Gα 15 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Gα 15 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus GNA15. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Gα 15 plasmide HDR (h) et le Gα 15 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie GNA15 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles GNA15 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.