Plasmide Double Nickase (h) GSTM2: sc-404795-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) GSTM2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GSTM2 Double Nickase (h) et le plasmide GSTM2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GSTM2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: GSTM2 Antibody (E-9): sc-376486
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) GSTM2 | sc-404795-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) GSTM2 | sc-404795-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La glutathion S-transférase mu 2 (GSTM2) est une enzyme cytosolique de détoxification de phase II qui catalyse la conjugaison du glutathion à des xénobiotiques électrophiles ainsi qu’à des produits endogènes de peroxydation lipidique, contribuant au maintien de l’homéostasie rédox et à la défense cellulaire contre le stress oxydatif. En tant qu’élément du réseau du métabolisme du glutathion, GSTM2 participe à la biotransformation d’intermédiaires réactifs et peut influencer la susceptibilité cellulaire aux lésions oxydatives et aux voies de signalisation associées à l’inflammation. Des variations de l’expression ou de l’activité de GSTM2 ont été associées à des différences interindividuelles de sensibilité aux substances chimiques et de réponses au stress, et cette enzyme est fréquemment étudiée dans des contextes où les espèces réactives de l’oxygène et la charge en électrophiles façonnent des phénotypes pertinents pour les maladies. En biologie des tumeurs et en recherche toxicologique, GSTM2 est également étudiée pour son rôle dans la modulation des réponses aux expositions environnementales et des voies du métabolisme des médicaments, sans pour autant impliquer des résultats cliniques.
GSTM2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GSTM2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GSTM2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GSTM2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GSTM2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.