GSTM1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-418201

Descripción general

GSTM1 codifica la glutatión S-transferasa mu 1 (GSTM1), una enzima de desintoxicación de fase II que cataliza la conjugación del glutatión con xenobióticos electrofílicos e intermediarios reactivos endógenos. Al limitar el estrés oxidativo y los aductos derivados de la peroxidación lipídica, GSTM1 contribuye a la homeostasis redox celular y favorece el metabolismo de fármacos, sustancias químicas ambientales y subproductos de la inflamación. Su actividad se integra con las vías antioxidantes dependientes de glutatión y con respuestas citoprotectoras más amplias al estrés, lo que influye en la susceptibilidad al daño oxidativo del ADN. La pérdida genética o la reducción de la expresión de GSTM1 se ha asociado con la variabilidad interindividual en el manejo de tóxicos y se ha estudiado en contextos en los que el estrés oxidativo y la exposición a carcinógenos contribuyen al riesgo de enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO GSTM1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen GSTM1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del GSTM1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de GSTM1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína GSTM1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en GSTM1 para la investigación de la señalización de GSTM1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de GSTM1 críticos para la función de GSTM1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de GSTM1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido GSTM1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido GSTM1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus GSTM1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR GSTM1 (h) y el plásmido HDR GSTM1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología GSTM1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana GSTM1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.