GSC Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420701
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- GSC El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico GSC, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: GSC Anticuerpo (L-36): sc-81964
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
GSC Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420701 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen **Gsc** de ratón codifica el factor de transcripción homeobox **GSC**, un regulador conservado del patrón embrionario y de la morfogénesis tisular. GSC actúa aguas abajo de importantes señales del desarrollo, incluidas las vías **TGF-β/BMP** y **Wnt**, para coordinar programas de expresión génica que controlan los movimientos de gastrulación, la especificación del eje y el desarrollo craneofacial. La regulación alterada de las redes transcripcionales homeobox es ampliamente relevante para las malformaciones congénitas y para contextos en los que los programas del desarrollo se reactivan en modelos de enfermedad. En consecuencia, **Gsc** se estudia con frecuencia en análisis de control transcripcional, compromiso de linaje y circuitos de regulación génica en sistemas de ratón.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO GSC (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Gsc en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Gsc junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Gsc tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína GSC.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Gsc para la investigación de la señalización de GSC, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Gsc críticos para la función de GSC
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Gsc para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido GSC CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido GSC CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Gsc. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR GSC (m) y el plásmido HDR GSC (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Gsc para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Gsc definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.