Plasmide Double Nickase (h) Grx2: sc-412093-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Grx2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Grx2 Double Nickase (h) et le plasmide Grx2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GLRX2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Grx2 | sc-412093-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **GLRX2** code la glutaredoxine-2 (Grx2), une oxydo-réductase thiol–disulfure qui utilise le glutathion pour catalyser la déglutathionylation réversible des protéines et maintenir l’homéostasie rédox mitochondriale et cytosolique. Grx2 module la gestion des espèces réactives de l’oxygène, soutient l’intégrité mitochondriale et influence des processus sensibles au rédox, notamment l’apoptose, la biogenèse des clusters fer–soufre et l’activité d’enzymes métaboliques. Par ces fonctions, **GLRX2** s’inscrit dans les réseaux de réponse au stress oxydant et dans les voies de signalisation dépendantes du glutathion qui façonnent l’adaptation cellulaire aux déséquilibres rédox. Des altérations du contrôle rédox impliquant **GLRX2** ont été étudiées dans des contextes de dysfonction mitochondriale et de dommages oxydatifs pertinents pour la neurodégénérescence, le stress cardiométabolique et les mécanismes de survie des cellules cancéreuses.
Grx2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GLRX2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GLRX2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GLRX2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GLRX2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.