gremlin-1 Lentiviral Activation Particles (m): sc-423885-LAC

Das Mausgen **Grem1** kodiert **Gremlin-1**, ein sezerniertes Cystin-Knoten-Protein, das als Antagonist von **BMP2**, **BMP4** und **BMP7** wirkt und dadurch die **BMP/SMAD-Signalübertragung** feinabstimmt, welche die embryonale Musterbildung, die Gewebemorphogenese sowie mesenchymal–epitheliale Interaktionen steuert. Durch die Modulation BMP-abhängiger Signale beeinflusst Gremlin-1 Zellschicksalsentscheidungen, den Umbau der extrazellulären Matrix und die Kommunikation zwischen Stroma und Parenchym in mehreren Organsystemen. Eine fehlregulierte **Grem1**-Expression wurde mit veränderten Entwicklungsprogrammen, fibrotischem Remodeling und mikroumgebungsbedingten Veränderungen in Verbindung gebracht, die mit der Tumorbiologie assoziiert sind; damit ist **Grem1** ein nützlicher Knotenpunkt, um das Zusammenspiel zwischen BMP und umfassenderen Netzwerken der **TGF-β**-Familie zu untersuchen. In-vitro- und In-vivo-Modelle nutzen **Grem1** häufig, um die Regulation von Differenzierung, Organoidwachstum und die Dynamik stromaler Signalgebung zu analysieren.

gremlin-1 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Grem1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

gremlin-1 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Grem1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen gremlin-1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Grem1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.