Plásmido Doble Nickase (m) GPR91: sc-429973-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)GPR91 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa GPR91 (m) y el plásmido de doble nickasa GPR91 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Sucnr1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) GPR91 | sc-429973-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) GPR91 | sc-429973-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen murino **Sucnr1** codifica **GPR91**, un receptor acoplado a proteína G sensible al succinato que vincula el estrés metabólico con la señalización inflamatoria y vascular. El succinato extracelular producido durante la hipoxia, la isquemia o la disfunción mitocondrial puede activar GPR91 y poner en marcha vías downstream que incluyen señalización mediada por **Gαi/Gαq**, activación de **MAPK/ERK**, flujo intracelular de **Ca²⁺** y modulación de **cAMP**, influyendo en la producción de citocinas y la comunicación paracrina. La actividad de GPR91 se ha estudiado en contextos como la fisiología renal y las respuestas a lesión, la señalización angiogénica retiniana, la inflamación del tejido adiposo y la activación de células inmunitarias, lo que convierte a **Sucnr1** en un nodo útil para investigar la regulación inmunometabólica. Estos procesos son relevantes para modelos experimentales de síndrome metabólico, fibrosis y remodelado tisular inflamatorio, en los que la acumulación de succinato actúa como señal.
GPR91 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Sucnr1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Sucnr1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Sucnr1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Sucnr1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.